結(jié)核病的分子實(shí)驗(yàn)檢測技術(shù)有哪些？
　　結(jié)核病是一種病因明確、治有辦法的疾病。它一年四季均可發(fā)病，15~35歲的人群是該病的高發(fā)人群，其潛伏期為4~8周，其中80%發(fā)生在肺部，其他部位也可繼發(fā)感染。
　　該病主要經(jīng)呼吸道傳播，傳染源是接觸排菌的肺結(jié)核患者?？菇Y(jié)核藥物具有殺菌、滅菌或抑菌作用，通過化療直接進(jìn)行抗菌治療效果顯著。
　　但是，結(jié)核病的診斷較為困難?，F(xiàn)在，我們可以利用多種實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)來診斷結(jié)核病，提高結(jié)核病診斷的特異性和敏感性。
　　其中，分子生物學(xué)檢測技術(shù)是近年來廣泛應(yīng)用的一種技術(shù)。目前，多種分子生物學(xué)檢測方法正在研發(fā)和評估之中，其敏感性較高，診斷快速，越來越受到廣大臨床醫(yī)生的青睞。
　　分子實(shí)驗(yàn)檢測的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)
　　聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)可以將標(biāo)本中微量的結(jié)核桿菌DNA（脫氧核糖核酸）加以擴(kuò)增。一般情況下，顯微鏡檢查僅能檢測到104~105條菌/毫升，而PCR技術(shù)可檢測出1~100飛克的結(jié)核桿菌的DNA，相當(dāng)于1~20條菌/毫升。
　　但是，在DNA提取過程中容易遭遇到污染等技術(shù)原因，從而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽性。此外，PCR技術(shù)無法區(qū)分死菌和活菌。
　　因此，PCR技術(shù)不能作為結(jié)核桿菌治療效果的評估依據(jù)，以及用于流行病學(xué)調(diào)查等。
　　目前，我們在采用PCR技術(shù)的同時(shí)，可以對結(jié)核桿菌耐藥相關(guān)基因（如與利福平耐藥相關(guān)的rpoB基因、與異煙肼耐藥相關(guān)的katG基因等）進(jìn)行檢測。
　　分子藥物敏感試驗(yàn)，也是應(yīng)用PCR技術(shù)進(jìn)行檢測的，這是對耐藥位點(diǎn)突變的一種檢測方法。它包括直接測序、高分辨率溶解曲線分析、線性探針雜交、基因芯片檢測技術(shù)，以及新近在國際上廣泛應(yīng)用的半巢式實(shí)時(shí)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)等。
　　其中，全自動(dòng)封閉操作的半巢式實(shí)時(shí)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)檢測方便，除了可以鑒定結(jié)核桿菌之外，還能檢測利福平耐藥的分子標(biāo)記，被世界衛(wèi)生組織推薦應(yīng)用于臨床治療前的快速分子藥物敏感性檢測與菌種的鑒定。
　　線性探針雜交方法與基因芯片檢測技術(shù)比較煩瑣，但是能對一線和二線的抗結(jié)核藥物敏感性進(jìn)行快速檢測，并且能夠應(yīng)用在非結(jié)核桿菌的菌種鑒定上面。
　　半巢式實(shí)時(shí)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)
　　全自動(dòng)封閉操作的半巢式實(shí)時(shí)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（XpertMTB/RIF）技術(shù)是一種自動(dòng)化的、以實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增為基礎(chǔ)的方法，以rpoB基因?yàn)榘谢?，檢測標(biāo)本中是否含有結(jié)核桿菌以及利福平是否耐藥。整個(gè)檢測過程大約需要2小時(shí)，并且具有良好的生物安全性和操作簡便性。